Page 33 - Laški smilj
P. 33

Genetske in genomske raziskave laškega smilja


                    Sekvenciranje        Helichrysum       Sekvenciranje
                      genoma              italicum         transkriptoma

                                        subsp. italicum
                         24 genomskih SSRs
                             HiUP                               23 genskih SSRs
                kloroplastni                                     EST-HiUP
                 genom
                H. italicum  16 kloroplastnih SSRs
                             cpHiUP

                Genetska raznolikost populacij   Identifikacija in selekcija
                       H. italicum                    genotipov


             Korzika     Italija
            (Francija)            Istra
                                 (Hrvaška)



            Slika 1   Genetske raziskave laškega smilja na UP FAMNIT: razvoj genoma in
                    transkriptoma ter treh nizov mikrosatelitskih označevalcev (HiUP,
                    cpHiUP, EST-HiUP)


            Mikrosateliti laškega smilja in njihova uporabnost v genetskih
            raziskavah
            Raziskovalci Univerze na Primorskem, Fakultete za matematiko, naravo-
            slovje in informacijske tehnologije (UP FAMNIT) smo prvi v svetovnem
            merilu razvili mikrosatelitske označevalce laškega smilja. K odločitvi za ra-
            zvoj je prispeval pregled genetskih raziskav in podatkovnih zbirk nukleo-
            tidnih zaporedij za laški smilj v letu 2020, s katerim smo ugotovili, da so in-
            formacije zanj izjemno skromne in omejene ter da ni razpoložljivih vrstno
            specifičnih molekulskih označevalcev. Mikrosatelite smo razvili iz zapore-
            dij, ki smo jih pridobili s sekvenciranjem genoma (DNA) in transkriptoma
            (RNA) ter jih uspešno uporabili za identifikacijo genotipov in preučevanje
            genetske raznolikosti naravnih populacij laškega smilja (slika 1).
            Sekvenciranje genomske DNA smo opravili s tehnologijo Ion Torrent. Iz
            pridobljenih 17.025.076 kakovostnih zaporedij s povprečno dolžino 245
            baznih parov (bp) smo pridobili 450.590 daljših zaporedij ali kontigov v
            skupni dolžini 258,6 Mbp, kar predstavlja 15,9 % predvidene celotne veli-
            kosti genoma laškega smilja (Baruca Arbeiter idr. 2021).
            Zložena nukleotidna zaporedja smo uporabili za razvoj mikrosatelit-
            skih označevalcev. Mikrosatelitske motive je vsebovalo 8,19 % kontigov
            (36.882), med katerimi so prevladovali dinukleotidni motivi (71,2  %;
                                                           33
   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37   38